幽门螺杆菌毒力基因数字PCR检测体系的建立

作     者：范宏博 蔡永洪 李月玥 梁志坚 张力玲 马婷婷 胡松青 胡良勇 FAN Hongbo;CAI Yonghong;LI Yueyue;LIANG Zhijian;ZHANG Liling;MA Tingting;HU Songqing;HU Liangyong

作者机构：华南理工大学食品科学与工程学院广东广州510630 广州计量检测技术研究院 

基　　金：广东省重点领域研发计划项目(2020B0404010002) 

出 版 物：《质量安全与检验检测》 (QUALITY SAFETY INSPECTION AND TESTING)

年 卷 期：2024年第34卷第1期

页      码：36-41页

摘      要：建立幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)毒力基因数字PCR检测体系,为Hp诊疗提供一个精准、灵敏的毒力定量检测方法。根据Hp毒力基因vacA和cagA的序列设计特异性引物和探针,采用质控菌评估检测特异性;以梯度法设置引物浓度和退火温度,对反应体系及反应条件进行优化;以梯度稀释的DNA为模板,评估检测灵敏度;采用不同浓度模板开展重复性检测,评估检测精密度。结果显示,所设计的引物和探针可特异性地检测vacA和cagA基因,不受大肠杆菌等细菌干扰。vacA和cagA基因的最佳反应温度分别为55.0℃和57.9℃,最佳引物工作浓度分别为650 nmol/L和550 nmol/L,线性分析的拟合度R^(2)分别为0.9991和0.9995,不同浓度样品的变异系数(CV)值均小于10%。本研究建立的Hp毒力基因vacA和cagA数字PCR检测体系具有特异、灵敏和重复性好等优点,可为Hp病理诊疗和科学研究提供精准、可靠的技术支持。

主 题 词：幽门螺杆菌 vacA cagA 数字PCR 精密度 重复性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 07[理学] 071005[071005] 10[医学] 

馆 藏 号：203126059...