基于荧光探针重组酶介导等温扩增技术快速检测食源性单增李斯特菌方法的建立

作     者：郭瑞 赵林萍 韩小改 郭毅 任宝红 GUO Rui;ZHAO Linping;HAN Xiaogai;GUO Yi;REN Baohong

作者机构：国家市场监管重点实验室(食品安全快速检测与智慧监管技术)河南郑州450003 郑州中道生物技术有限公司河南郑州450001 河南省食品和盐业检验技术研究院河南郑州450000 

基　　金：国家市场监管重点实验室(食品安全快速检测与智慧监管技术)科研项目(ZDSYS202305) 

出 版 物：《食品安全导刊》 (China Food Safety Magazine)

年 卷 期：2023年第32期

页      码：101-104,108页

摘      要：目的:建立一种基于荧光探针重组酶介导等温核酸扩增(Recombinant Enzyme Mediated Isothermal Nucleic Acid Amplification,RAA)技术的快速检测食源性单增李斯特菌的方法。方法:针对单增李斯特菌hlyA基因的保守序列设计特异性引物和探针,通过构建含hlyA靶基因片段的重组质粒和不同浓度单增李斯特菌核酸,评价其灵敏度;通过检测大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌等菌液核酸,评价其特异性。结果:所建立的荧光RAA法可在39℃、20 min内完成样本核酸的检测。采用所建立的方法对质粒和核酸进行检测,质粒最低检出限为1 copy/μL,菌液核酸最低检测限为103 CFU·mL^(-1),且与其他菌株核酸无交叉反应。结论:成功建立了一种基于荧光RAA法的单增李斯特菌核酸检测方法,该方法具有特异性强和快速的特点,可用于疑似污染单增李斯特菌食品的快速检测。

主 题 词：单增李斯特菌 重组酶介导等温核酸扩增 hlyA 核酸检测 

学科分类：13[艺术学] 1302[艺术学-音乐与舞蹈学类] 

D　O　I：10.16043/j.cnki.cfs.2023.32.048

馆 藏 号：203126070...