传染性皮下和造血器官坏死病毒RPA与CRISPRCas12a可视化快速检测方法的建立

作     者：周傲白雪 徐博文 沙才华 邵建宏 赵福振 廖秀云 黄海超 蒋晓霞 罗宝正 陈轩 ZHOU Aobaixue;XU Bowen;SHA Caihua;SHAO Jianhong;ZHAO Fuzhen;LIAO Xiuyun;HUANG Haichao;JIANG Xiaoxia;LUO Baozheng;CHEN Xuan

作者机构：拱北海关技术中心广东珠海519015 

基　　金：广东省重点领域研发计划项目(2022B1111030001) 拱北海关科研项目(2023GK009) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第54卷第5期

页      码：595-601页

摘      要：根据传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)基因序列的保守区域设计并合成多组RPA引物和特异性crRNA,经过筛选与优化,建立RPA-Cas12a系统荧光检测法和试纸条法2种可视化快速检测IHHNV的方法。结果显示,这2种可视化检测方法在37℃恒温反应40 min可检测出IHHNV;与对虾白斑综合征病毒、虾肝肠胞虫和十足目虹彩病毒1无交叉反应;该方法灵敏度较高,最低检测浓度为10 copies/μL;应用该方法对10份IHHNV阳性临床样本进行检测,阳性检出率为100%。综合结果表明,建立的荧光法和试纸条2种可视化检测IHHNV的方法操作简单,反应灵敏,适用于对虾养殖场或基层实验室对IHHNV的定期监测和初筛。

主 题 词：传染性皮下和造血器官坏死病毒 重组酶聚合酶扩增 CRISPR-Cas12a 检测方法 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0099

馆 藏 号：203126113...