基于牛结节性皮肤病病毒ORF61基因荧光定量检测方法的建立

作     者：马春玲 任善会 杨雪 蔺玉刚 李积雲 王相伟 殷相平 孙跃峰 万学瑞 陈豪泰 MA Chunling;REN Shanhui;YANG Xue;LIN Yugang;LI Jiyun;WANG Xiangwei;YIN Xiangping;SUN Yuefeng;WAN Xuerui;CHEN Haotai

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所兰州730046 甘肃农业大学兰州730070 塔里木大学阿拉尔843300 青海省科学技术研究院信息研究所西宁810003 

基　　金：国家自然科学基金(32302850) 甘肃省科技计划资助(22JR5RA035) 甘肃省科技重大专项(22ZD6NA001) 中国农业科学院兰州兽医研究所基本科研业务费(1610312021008) 

出 版 物：《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)

年 卷 期：2024年第55卷第4期

页      码：1800-1809页

摘      要：基于国内流行的牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus, LSDV)的基因组序列,建立了靶向ORF61基因的MGB探针荧光定量PCR检测方法。本研究基于LSDV基因序列设计出带有MGB探针的特异性荧光定量PCR引物,并进行特异性和灵敏性筛选验证。最终,筛选得到靶向于LSDV ORF61基因的一对qPCR引物;利用pCAGGS-ORF61真核表达质粒,获得标准曲线y=-3.287 5x+47.87,线性相关系数R^(2)=0.998 6,扩增效率达101%;荧光定量PCR特异性、重复性和灵敏性试验结果表明,该引物的特异性高、重复性良好和灵敏度高等优点;该引物的最低检测限为6.71拷贝·μL^(-1),各批次内与批次间重复性结果的变异系数均小于2%。以上结果表明,作者建立特异性LSDV的荧光定量PCR检测方法,为LSD预防和控制提供有效的检测手段。

主 题 词：牛结节性皮肤病病毒 ORF61 MGB探针 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 0902[农学-自然保护与环境生态类] 090201[090201] 

核心收录：

D　O　I：10.11843/j.issn.0366-6964.2024.04.041

馆 藏 号：203126118...