禽源大肠杆菌荧光定量PCR方法的构建及应用

作     者：高艺玮 田堯 孙少迪 牛灵玥 文立华 杨俊 王红兵 王慧 杜丽飞 刘俊琦 周望平 GAO Yiwei;TIAN Yao;SUN Shaodi;NIU Lingyue;YANG Jun;WANG Hongbin;WANG Hui;DU Lifei;LIU Junqi;ZHOU Wangping

作者机构：湖南省畜牧兽医研究所湖南长沙410131 湖南农业大学动物医学院湖南长沙410128 

基　　金：湖南现代农业产业技术体系项目(湘222号) 

出 版 物：《湖南畜牧兽医》 (Hunan Journal of Animal Science & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第1期

页      码：31-35页

摘      要：为建立一种灵敏、准确且快速检测禽源大肠杆菌的方法,根据禽源大肠杆菌uidA基因的一节特异性保守序列设计引物,建立用于禽源大肠杆菌的荧光定量PCR(qPCR)检验方法,并对其各方面进行评价。试验数据表明所建立的qPCR方法的Ct值与标准品在4.69×10^(2)~4.69×10^(9 )copies/μL范围内存在优良的线性关系,线性相关系数为R2=0.993;该方法标准曲线方程为y=-3.2786x+39.032,熔解曲线表现为单峰,不存在非特异性扩增。对重组质粒标准品的最低检测浓度为4.69×10^(2) copies/μL,是普通PCR方法的1000倍。该方法检测临床样本阳性率为68.3%(41/60),普通PCR阳性检出率为23.3%(14/60),阳性检出率高出45%。此次研究建立的检测禽源大肠杆菌的荧光定量PCR检测方法可用于禽源大肠杆菌的快速诊断,对于禽大肠杆菌病的监测具有重要意义。

主 题 词：禽源大肠杆菌 uidA基因 实时荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-4907.2024.01.011

馆 藏 号：203126124...