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全蝎分子鉴定及其配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

全蝎分子鉴定及其配方颗粒的位点特异性PCR鉴别

作     者:段宝丽 陈天韵 施丹丹 尤春雪 蒋超 DUAN Bao-li;CHEN Tian-yun;SHI Dan-dan;YOU Chun-xue;JIANG Chao

作者机构:天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300392 中国中医科学院中药资源中心道地药材品质保障与资源持续利用全国重点实验室北京100700 

基  金:国家自然科学基金项目(83073972) 中国中医科学院中药资源中心自主选题研究项目(ZZXT202212) 

出 版 物:《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期:2024年第49卷第4期

页      码:942-950页

摘      要:全蝎是我国临床常用动物药材,《中国药典》规定全蝎的唯一基原为钳蝎科动物东亚钳蝎,但目前我国蝎目物种丰富,全蝎药材及其深加工制品都存在混伪现象,其中全蝎深加工制品在加工过程中,其显微特征可能不完整或丢失,使得基原鉴别变得困难。该研究基于东亚钳蝎与其他蝎物种的形态和氧化酶亚基1(COⅠ)序列,构建ML系统发育树进行物种鉴定,从而发现全蝎主要混伪品为细尖狼蝎;使用特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴定方法,通过COⅠ序列的差异SNP位点设计东亚钳蝎特异性鉴别引物,并筛选出全蝎药材与其配方颗粒的稳定引物区间,对全蝎药材及配方颗粒进行鉴定。通过优化PCR反应体系,当退火温度61℃、循环次数30次时,东亚钳蝎及其配方颗粒均可扩增出约150 bp明亮的特异性条带,其他混伪品均无条带。并对该方法的适应性进行考察,全蝎药材到冻干粉再到配方颗粒以及市售配方颗粒均可扩增出约150 bp的条带。研究结果表明,该方法可用于全蝎药材及其配方颗粒真伪鉴别,有利于完善全蝎配方颗粒的质量控制体系,为其临床应用提供保障。

主 题 词:全蝎 配方颗粒 聚合酶链式反应 系统发育树 物种鉴别 

学科分类:1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.19540/j.cnki.cjcmm.20231013.104

馆 藏 号:203126624...

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