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鳖甲配方颗粒的位点特异性PCR鉴别研究

鳖甲配方颗粒的位点特异性PCR鉴别研究

作     者:谭斯尹 宋叶 范耀耀 刘闪闪 胡绮萍 罗宇琴 李国卫 TAN Si-yin;SONG Ye;FAN Yao-yao;LIU Shan-shan;HU Qi-ping;LUO Yu-qin;LI Guo-wei

作者机构:广东一方制药有限公司/广东省中药配方颗粒企业重点实验室广东佛山528244 

基  金:广东省基础与应用基础研究基金自然科学基金项目(2020B1515120033) 

出 版 物:《中药材》 (Journal of Chinese Medicinal Materials)

年 卷 期:2023年第46卷第9期

页      码:2160-2164页

摘      要:目的:建立一种鳖甲配方颗粒特异性聚合酶链式反应(PCR)鉴别方法。方法:根据中华鳖Trionyx sinensis及其混伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ(COXⅠ)基因序列,筛选出中华鳖的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计鳖甲鉴别专属引物BJ-5F及BJ-5R。通过优化PCR反应条件,确定最佳的PCR反应体系,并对该方法进行耐受性、适用性考察和测序验证。结果:当退火温度为60℃,循环33次时,鳖甲药材、标准汤剂冻干粉及配方颗粒均可在约236 bp处得到清晰单一的中华鳖条带,其混伪品及阴性对照品均无此条带。结论:该研究所建立的特异性PCR鉴别方法适用于快速鉴定鳖甲药材、标准汤剂冻干粉及配方颗粒的真伪,且具有专属性强、准确性高、简便易行等特点,为鳖甲配方颗粒质量标准的制定提供了参考依据。

主 题 词:鳖甲 配方颗粒 位点特异性PCR 分子鉴定 

学科分类:100703[100703] 1007[医学-药学类] 10[医学] 

D O I:10.13863/j.issn1001-4454.2023.09.009

馆 藏 号:203126653...

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