幽门螺杆菌微滴式数字PCR检测体系建立

作     者：范宏博 蔡永洪 李月玥 梁志坚 张力玲 马婷婷 胡松青 胡良勇 FAN Hongbo;CAI Yonghong;LI Yueyue;LIANG Zhijian;ZHANG Liling;MA Tingting;HU Songqing;HU Liangyong

作者机构：广州计量检测技术研究院科发部广州510700 华南理工大学食品科学与工程学院广州510630 

基　　金：广东省重点领域研发计划项目(2020B0404010002) 

出 版 物：《中国公共卫生》 (Chinese Journal of Public Health)

年 卷 期：2024年第40卷第1期

页      码：87-90页

摘      要：目的建立幽门螺杆菌(Hp)数字PCR检测体系,为Hp诊断提供一个精准、灵敏的定量检测方法。方法根据Hp 16S rRNA序列设计特异性引物和探针,采用质控菌进行特异性检验;以梯度稀释的DNA为模板,评估检测灵敏度;采用不同浓度的模板进行多重复检测,评估检测精密度;以梯度法设置引物浓度和退火温度,对数字PCR反应条件进行优化。结果所设计的引物和探针可特异性地检测Hp 16S rRNA基因,不受大肠杆菌等细菌干扰;该方法的最佳反应温度为57.1℃,最佳引物浓度为550 nmol/L;该体系的检测限为0.35 copies/μL,检测变异系数CV<10%,浓度梯度线性分析的拟合度R^(2)=0.9968。结论本研究建立的Hp数字PCR检测体系,具有特异、灵敏和精密度高的特点。

主 题 词：幽门螺杆菌 数字PCR 精密度 灵敏度 特异性 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.11847/zgggws1142843

馆 藏 号：203127153...