猪库布病毒纳米PCR快速检测方法的建立

作     者：李睿 凤焱 孙亮 姜秋杰 呼延含荣 张秀森 程敏 郭利 赵立峰 LI Rui;FENG Yan;SUN Liang;JIANG Qiujie;HUYAN Hanrong;ZHANG Xiusen;CHENG Min;UO Li;ZHAO Lifeng

作者机构：吉林农业大学吉林长春130122 吉林农业科技学院吉林吉林132101 吉林省动物疫病预防控制中心吉林长春133000 辽源动物疫病预防控制中心吉林辽源136300 

基　　金：吉林省科技厅科技发展计划项目(YDZJ202203CGZH050,20210202101NC) 吉林省农业关键核心技术示范推广项目(202300702) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第54卷第3期

页      码：325-329页

摘      要：为了给临床检测猪库布病毒(PKV)提供更加准确便捷的检测方法,本试验设计了1对特异性引物,扩增PKV基因组的VP0区域。在传统PCR反应体系中添加纳米金颗粒材料,优化后建立了一种方便快捷且特异检测PKV的nano-PCR方法。结果显示,该方法能特异性扩增猪库布病毒,与猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪轮状病毒、猪札幌病毒均无交叉反应。nano-PCR相对于普通PCR表现出更高的敏感性,普通PCR的最低核酸检测浓度为5.61×10^(-7)ng/μL,而nano-PCR的最低核酸检测浓度为5.61×10^(-10)ng/μL,敏感性提高了1000倍。对来自不同发病猪场30份腹泻猪的粪便和血液临床样本的检测结果显示,nano-PCR阳性检出率为23.33%(7/30),普通PCR阳性检出率为16.66%(5/30)。结果表明,本试验建立的nano-PCR方法在猪库布病毒的检测中表现出更高的特异性和敏感性,对猪库布病毒的快速诊断和检测具有重要的临床意义。

主 题 词：猪库布病毒 nano-PCR 纳米金颗粒 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0041

馆 藏 号：203127296...