大肠埃希氏菌噬菌体swi2裂解系统的表达及协同抑菌活性测定

作     者：邹玲 赵天祎 王馨锐 甄建瑜 刘文华 张灿 ZOU Ling;ZHAO Tian-yi;WANG Xin-rui;ZHEN Jian-yu;LIU Wen-hua;ZHANG Can

作者机构：青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 

基　　金：山东省自然科学基金项目(ZR2021MC053) 青岛市关键技术攻关及产业化示范类项目(23-1-4-xxgg-21-nsh) 青岛农业大学研究生创新计划项目(QNYCX22005) 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2024年第45卷第4期

页      码：75-81页

摘      要：为了确定大肠埃希氏菌噬菌体swi2裂解系统的穿孔素(holin)与裂解酶(lysin1、lysin2)在裂解宿主菌过程中的协同作用,根据噬菌体swi2裂解系统的基因序列设计引物,搭桥PCR法分别扩增holin-lysin1、holin-lysin2、lysin1-lysin2基因,以pColdTF为载体,构建重组质粒pCold-holin-lysin1、pCold-holin-lysin2、pCold-lysin1-lysin2,在大肠埃希氏菌BL21中诱导表达,并测定各串联蛋白对大肠埃希氏菌BL21的菌内外裂解活性。结果表明,成功构建了噬菌体swi2裂解系统相关基因两两串联的重组质粒,并在原核系统中实现了holin-lysin1、holin-lysin2、lysin1-lysin2蛋白的可溶性表达。lysin1、lysin2具有天然的菌内和菌外裂解活性,而单独的holin未表现出任何抑菌活性;lysin1与lysin2、holin与lysin1之间无协同作用,而holin与lysin2之间存在协同作用,可以显著增强lysin2的菌内外裂解活性(P<0.05)。研究结果证明了lysin1和lysin2在噬菌体swi2增殖后期替代holin完成裂解宿主菌的过程,两者之间不存在协同作用,这将为进一步阐明噬菌体swi2的裂解机制提供参考。

主 题 词：噬菌体swi2 穿孔素 裂解酶 协同作用 抑菌活性 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1007-5038.2024.04.013

馆 藏 号：203127301...