表达元件优化促进重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达

作     者：程逸凡 张萌 许菲 CHENG Yifan;ZHANG Meng;XU Fei

作者机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室江苏无锡214122 

基　　金：国家自然科学基金(22078129) 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2024年第50卷第14期

页      码：1-9页

摘      要：重组胶原蛋白是一种具有广泛应用潜力的生物材料,近年来引起了生物医学、组织工程等众多领域的关注。胶原蛋白的3股螺旋结构赋予其独特的生物学功能和生物相容性,但也增加了其在微生物系统中表达的复杂性。该研究以细菌胶原蛋白V-B作为模式蛋白,通过对表达元件的优化,促进重组胶原蛋白在谷氨酸棒杆菌中的表达。首先通过启动子筛选和发酵时长优化,获得介导V-B表达的最优启动子tac-R0。接着利用RBS calculator设计核糖体结合位点(ribosomal binding site,RBS)和间隔序列(aligned spacing,AS)的突变文库,得到与tac-R0启动子搭配组合的最优RBS和AS,使V-B的产量提高至514 mg/L。此外,通过多基因表达盒的串联组合策略,将多个目的基因串联,最终V-B的产量较初始水平提高了8.4倍,达697 mg/L,该研究为重组胶原蛋白的工业化生产提供了基础。

主 题 词：重组胶原蛋白 谷氨酸棒杆菌 启动子 核糖体结合位点 串联表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 081703[081703] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.039106

馆 藏 号：203127402...