采用实时荧光定量PCR法检测大曲中的3种高温放线菌

作     者：陈政 柴丽娟 张晓娟 许泓瑜 史劲松 王松涛 张宿义 沈才洪 许正宏 陆震鸣 CHEN Zheng;CHAI Lijuan;ZHANG Xiaojuan;XU Hongyu;SHI Jinsong;WANG Songtao;ZHANG Suyi;SHEN Caihong;XU Zhenghong;LU Zhenming

作者机构：江南大学生物工程学院江苏无锡214122 江南大学粮食发酵与食品生物制造国家工程研究中心江苏无锡214122 江南大学生命科学与健康工程学院江苏无锡214122 国家固态酿造工程技术研究中心四川泸州646000 四川大学轻工科学与工程学院四川成都610065 

基　　金：国家科技基础资源调查专项(2021FY100900) 

出 版 物：《食品与发酵工业》 (Food and Fermentation Industries)

年 卷 期：2024年第50卷第18期

页      码：300-308页

摘      要：建立实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)方法对大曲中3种高温放线菌(Thermoactinomyces vulgaris、***和***)进行特异性定量检测。根据***、***、***全基因组中特异性单拷贝核心基因recA、mdH、gyrA为参考序列分别设计了一对可扩增278、233、291 bp片段的引物;经特异性、有效性、准确性实验显示,在常见的13种白酒酿造微生物中,引物TV、TI、TD分别可特异性检测***、***、***,检测范围为2.82~8.82 lg copies/μL,加标回收率95%~105%。进一步对大曲发酵过程样品检测,结果显示,***含量在呈现波动趋势,在第5天达到最高,为(6.06±0.02)lg copies/g;***含量呈现先上升后下降的趋势,在第7天达到最高,为(6.33±0.13)lg copies/g;***含量在0~12 d呈现波动趋势,在12~14 d下降,随后一直上升,发酵结束时含量最高,为(7.62±0.02)lg copies/g。该研究建立的RT-qPCR方法可对大曲发酵过程中3种高温放线菌进行特异性鉴定和快速定量,为进一步监测高温放线菌在白酒酿造过程中的功能提供了方法。

主 题 词：大曲 高温放线菌 特异性引物 实时荧光定量PCR 

学科分类：0832[0832] 08[工学] 

核心收录：

D　O　I：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.038920

馆 藏 号：203127454...