基于重组酶聚合酶扩增技术的牛源性成分快速检测方法

作     者：王晓雪 纪艺 余卉茹 徐俊锋 彭城 汪小福 李玥莹 陈笑芸 WANG Xiaoxue;JI Yi;YU Huiru;XU Junfeng;PENG Cheng;WANG Xiaofu;LI Yueying;CHEN Xiaoyun

作者机构：沈阳师范大学生命科学学院沈阳110000 浙江省农业科学院农产品质量安全与营养研究所农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室农业农村部农业转基因生物溯源重点实验室杭州310021 湘湖实验室杭州311258 

基　　金：科技创新2030重大项目农业生物育种重大专项(2022ZD040212) 浙江省重点研发项目(2021C02059) 

出 版 物：《生物技术进展》 (Current Biotechnology)

年 卷 期：2024年第14卷第2期

页      码：278-286页

摘      要：市场中肉类食品掺假的复杂多样化使得监管机构对动物源性成分鉴定的便捷性、准确性、灵敏性要求越来越高。尤其是市场上经济价值较高的牛肉类产品已成为制假的重灾区,迫切需要建立一种快速、高效的牛源性成分分子检测方法。基于此,以牛组成型表达基因β-actin为靶基因设计并筛选了几组牛特异性扩增的引物和探针组合,经过灵敏度检测和特异性验证,建立了一种牛源性成分实时荧光重组酶聚合酶扩增技术(recombinase polymerase amplification,RPA)快速检测方法。通过优化试剂配比,提高了一步法提取牛肉制品DNA的效率,同时将PRA技术与胶体金免疫试纸条显色技术相结合实现了检测的便捷化和结果的可视化。实际应用结果表明,研究建立的牛源性RPA检测方法能够特异性地检测牛源性成分,且最低检测灵敏度可达到14.8个拷贝,通过胶体金免疫试纸条得到的可视化结果的准确性和灵敏度与实时荧光RPA相同。该方法特异性强、灵敏度高,整个过程在25 min内即可完成,极大缩短了检测时间。

主 题 词：牛源性成分 重组酶聚合酶扩增技术 胶体金免疫试纸条 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0903[农学-动物生产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.19586/j.2095-2341.2023.0150

馆 藏 号：203127461...