一株大黄鱼虹彩病毒的分离鉴定及多克隆抗体的制备

作     者：刘笑茹 郑义华 赵路品 高娃 祁婧婷 吕利群 胡鲲 姜有声 LIU Xiaoru;ZHENG Yihua;ZHAO Lupin;GAO Wa;QI Jingting;LYU Liqun;HU Kun;JIANG Yousheng

作者机构：上海海洋大学国家水生动物病原库上海201306 上海海洋大学水产科学国家级实验教学示范中心上海201306 上海海洋大学水产动物遗传育种中心上海市协同创新中心上海201306 

基　　金：国家重点研发计划(2019YFD0900101) 江苏水产重大病毒性疫病快速诊断技术研发及示范应用(BE2021369) 国家淡水水产种质资源库(FGRC:18537) 

出 版 物：《水产学杂志》 (Chinese Journal of Fisheries)

年 卷 期：2024年第37卷第2期

页      码：39-45页

摘      要：2021年7月,浙江省象山某养殖场养殖的大黄鱼(Larimichthys crocea)出现类似大黄鱼虹彩病毒引起的疾病。采用鲤上皮瘤细胞培养和病毒主要衣壳蛋白测序分析的方法,从患病的大黄鱼中分离到一株病毒。该病毒接种到鲤上皮瘤细胞(EPC)后出现空斑、脱落的细胞病变症状。根据虹彩病毒MCP和ATPase基因保守序列设计特异性引物对病毒组织样本进行PCR扩增,得到分别为1 367 bp和740 bp的目的基因片段。将MCP基因扩增片段测序,经BLAST对比及系统发育树聚类分析,确定该分离的病毒属虹彩病毒科细胞肿大病毒属。通过蔗糖密度梯度离心纯化,用透射电镜观察该病毒粒子呈正六边形,直径为120~150 nm。用纯化病毒作为抗原免疫小鼠获得抗大黄鱼虹彩病毒的多克隆抗体,效价为1∶7 000;通过SDS-PAGE和Western blotting初步确定3个免疫蛋白。本研究为大黄鱼虹彩病毒纯化提供一种新方法,并初步分离出免疫蛋白,为该病毒相关分子生物学研究、蛋白研究以及疫苗制备等提供理论依据。

主 题 词：大黄鱼 虹彩病毒 细胞肿大病毒 分离鉴定 病毒纯化 多克隆抗体 

学科分类：090801[090801] 0908[0908] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-3832.2024.02.006

馆 藏 号：203127486...