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猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

作     者:王宏燕 方方 杨作丰 董娜 赵方圆 巩玉洁 赵荣茂 朱丽君 严鑫莹 崔雨葳 王连山 刘晓明 姜斌 

作者机构:辽宁省农业发展服务中心辽宁沈阳110032 沈阳市农业综合行政执法队辽宁沈阳110031 北京纳百生物科技有限公司北京100176 

基  金:辽宁省科学技术厅应用基础研究计划项目(2023JH2/101300164) 

出 版 物:《养猪》 (Swine Production)

年 卷 期:2023年第6期

页      码:58-61页

摘      要:本研究根据PRRSV GL膜蛋白基因和CSFV多聚蛋白基因,分别设计2对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒的双重TaqMan荧光定量RT-PCR方法。结果表明,该方法只对猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒特异性良好,不与非洲猪瘟、猪圆环病毒Ⅱ型、猪伪狂犬病毒、猪细小病毒等常发猪病存在交叉反应;PRRSV和CSFV的检出下限分别为1.41拷贝/μL和1.6拷贝/μL;组内和组间Ct值变异系数都小于1.3%。对175份临床采集的样品检测,PRRSV单一阳性样品27份,CSFV单一阳性样品16份,检测双阳性样品24份。本方法敏感高、特异强,可以用于猪场的快速检测与诊断。

主 题 词:猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪瘟病毒 双重荧光定量RT-PCR 

学科分类:0905[农学-林学类] 09[农学] 

D O I:10.3969/j.issn.1002-1957.2023.06.015

馆 藏 号:203127537...

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