柔嫩艾美耳球虫重组Profilin蛋白对鸡的免疫保护效果评价

作     者：刘倩琳 李翌琳 周爽 武欣欣 刘永宁 段思彰 安健 张建军 LIU Qianlin;LI Yilin;ZHOU Shuang;WU Xinxin;LIU Yongning;DUAN Sizhang;AN Jian;ZHANG Jianjun

作者机构：北京农学院动物科学技术学院北京102206 

基　　金：2022年北京农学院学位与研究生教育改革与发展项目(2022YJS029) 

出 版 物：《北京农学院学报》 (Journal of Beijing University of Agriculture)

年 卷 期：2024年第39卷第2期

页      码：66-72,78页

摘      要：【目的】通过对柔嫩艾美耳球虫(***)Profilin基因进行原核表达和纯化,探明重组Profilin蛋白对鸡的免疫保护效果。【方法】设计合成Profilin基因特异性引物,提取***孢子化卵囊总RNA,反转录成cDNA,用PCR扩增获得Profilin基因后连接至pET-32a(+)载体构建重组质粒pET-32a(+)-Profilin,在IPTG诱导下进行表达并纯化。用重组Profilin蛋白免疫雏鸡,随后经口服感染柔嫩艾美耳球虫卵囊,测定和统计雏鸡存活率、平均增重、血便计数、每克粪便卵囊数、卵囊产量、盲肠病变,计算抗球虫指数,观察盲肠组织病理学变化并测定血清中IL-2、IL-10、TNF-α、sIgA的水平以评估重组Profilin蛋白的免疫保护效果。【结果】成功表达了重组Profilin蛋白,大小为39.1 kDa。免疫保护试验表明:Profilin重组蛋白组鸡只存活率、鸡只血便数和OPG相对于感染不免疫攻虫组显著减少(P0.05)。在攻虫后7 d,感染不免疫攻虫组血清中IL-2、TNF-α、IL-10以及sIgA水平相比于空白对照组均极显著升高(P<0.01),而重组蛋白免疫组血清中IL-2、TNF-α、IL-10以及sIgA水平极显著低于攻虫不免疫组(P<0.01)。【结论】柔嫩艾美耳球虫重组Profilin蛋白可减少感染雏鸡的增重损失和卵囊排出,引发雏鸡体内的细胞免疫和体液免疫,具有一定的免疫保护效果。

主 题 词：柔嫩艾美耳球虫 原核表达 Profilin 雏鸡 免疫保护 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2024.0212

馆 藏 号：203127539...