响应面法优化产H因子结合蛋白的重组大肠埃希菌发酵条件

作     者：张宇 郭通 陈浩 杨飞鸽 苏桂民 朱卫华 杜琳 ZHANG Yu;GUO Tong;CHEN Hao;YANG Feige;SU Guimin;ZHU Weihua;DU Lin

作者机构：北京智飞绿竹生物制药有限公司研发中心北京市细菌性疫苗工程技术研究中心北京100176 

出 版 物：《微生物学免疫学进展》 (Progress In Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2024年第52卷第2期

页      码：43-51页

摘      要：目的 使用响应面法(response surface methodology, RSM)对重组大肠埃希菌fHBP-B-1/BL21(DE3)的发酵条件进行优化,以提高目的蛋白表达量。方法 在单因素试验的基础上,利用Plackett-Burman试验筛选出对目的蛋白表达有显著影响的因素;再用最陡爬坡试验及Box-Behnken设计进一步优化试验条件并进行验证。结果 单因素试验结果显示,在酵母抽提物质量浓度为12.500 g/L、硫酸镁质量浓度为0.250 g/L、初始pH为6.00、诱导培养时间为8 h、诱导温度为35.00℃时,目的蛋白表达量最高,为363.04μg/mL。酵母抽提物质量浓度、硫酸镁质量浓度及诱导培养温度是影响目的蛋白表达量的显著因素。发酵条件优化后,酵母抽提物质量浓度为10.500 g/L、硫酸镁质量浓度为0.220 g/L、初始pH为6.00、诱导培养时间为4 h、诱导培养温度为37.50℃时,可以获得425.62μg/mL的目的蛋白,较单因素试验结果提高了17.25%。结论 重组大肠埃希菌fHBP-B-1/BL21(DE3)的发酵条件优化后,目的蛋白的表达量明显提升,为重组B群脑膜炎球菌疫苗后续工艺的开发奠定基础。

主 题 词：重组大肠埃希菌 响应面法 Plackett-Burman设计 最陡爬坡试验 H因子结合蛋白 B群脑膜炎奈瑟菌 

学科分类：081703[081703] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 0836[0836] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

D　O　I：10.13309/j.cnki.pmi.2024.02.007

馆 藏 号：203127602...