高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白CD_4^+ T细胞表位优势区的鉴定

作     者：方剑玉 郑其升 郭小参 侯凤香 王琳 陶红梅 侯继波 陈溥言 FANG Jian-yu;ZHENG Qi-sheng;GUO Xiao-can;HOU Feng-xiang;WANG Lin;TAO Hong-mei;HOU Ji-bo;CHEN Pu-yan

作者机构：国家兽用生物制品研究中心江苏南京210014 南京农业大学动物医学院江苏南京210095 河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 

基　　金：中国博士后科学基金项目(20080441060) 江苏省农业科学院科研基金项目(6110820) 

出 版 物：《南京农业大学学报》 (Journal of Nanjing Agricultural University)

年 卷 期：2011年第34卷第1期

页      码：107-112页

摘      要：采用RT-PCR方法扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)临床分离株的M基因(525 bp),通过设计4对引物,把M蛋白分成4段K1(78-112)、K2(98-131)、K3(118-153)、K4(139-174),分别扩增相应基因M1、K1、K2、K3和K4,连接pET-32a(+)表达载体,经鉴定后转化Escherichia coliBL21,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western-blot检测结果显示,分别在相对分子质量30.8×103和24.4×103位置出现目的条带,重组蛋白均可与阳性血清发生特异反应。将蛋白M1免疫BALB/c小鼠,于第三次免2周后从小鼠脾脏分离淋巴细胞,分别用K1、K2、K3、K4蛋白进行体外刺激。流式细胞仪检测分泌IFN-γ细胞因子的T细胞的频率,K1蛋白刺激组显著高于其他组和对照组(P≤0.01)。结论:M1蛋白K1(78-112)段为T细胞表位优势区。

主 题 词：高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白 T细胞表位 表位优势区 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203127952...