H9N2禽流感病毒HA蛋白mRNA疫苗的构建表达及鉴定

作     者：花悦 宋奇珊 王东东 杨思敏 王颖 任建乐 牛胜 尚桂军 赵宇军 田文霞 HUA Yue;SONG Qishan;WANG Dongdong;YANG Simin;WANG Ying;REN Jianle;NIU Sheng;SHANG Guijun;ZHAO Yujun;TIAN Wenxia

作者机构：山西农业大学动物医学学院山西晋中030801 山西高等创新研究院功能蛋白结构解析山西省重点实验室山西太原030032 

基　　金：中美疾病预防控制中心合作项目(5U01IP001106-04-00,2022HX116,E2900901-02) 山西省重点研发项目(202102130501001) 山西省现代农业产业技术体系建设专项资金(2021-07,2022-07,2023CYJSTX15-09) 山西省科技创新青年人才团队项目(202204051001022) 功能蛋白结构解析山西省重点实验室资助项目(202104010910006) 山西省1331工程项目(20211331-13) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第54卷第5期

页      码：609-614页

摘      要：H9N2亚型禽流感病毒(AIV)是严重危害家禽养殖业的病原,由于目前的疫苗无法应对突发的AIV疫情,因此本研究设计一种基于血凝素(HA)基因的抗H9N2亚型禽流感病毒mRNA疫苗。在原有Puc57克隆载体基础上,构建mRNA体外转录模板,将PCR得到的HA基因和EGFP基因插入模板中构建重组质粒Puc57-HA和Puc57-EGFP。将重组质粒线性化后,进行体外转录、加帽、加尾、纯化等一系列修饰并转染鸡成纤维细胞(DF-1),观察48 h荧光表达情况,并用Western-blot检测HA蛋白在细胞中的表达。结果显示,48 h出现绿色荧光,Western-blot显示HA蛋白成功表达。本试验为H9N2禽流感mRNA疫苗的研制奠定了基础。

主 题 词：禽流感 mRNA疫苗 体外转录 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2024.0089

馆 藏 号：203127954...