血清1型FAdV TaqMan探针荧光定量PCR方法的建立及应用

作     者：刘琳 宋亚鹏 刘明洋 高文明 陶明月 宋晓楠 张宜娜 李新生 LIU Lin;SONG Yapeng;LIU Mingyang;GAO Wenming;TAO Mingyue;SONG Xiaonan;Zhang Yina;LI Xinsheng

作者机构：河南农业大学动物医学院河南郑州450046 

基　　金：国家自然科学基金青年基金资助项目(32102653) 河南省高等学校重点科研资助项目(23B230002) 河南省科技攻关基金资助项目(232102110083) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2024年第44卷第5期

页      码：881-886页

摘      要：为特异性地检测家禽中血清1型禽腺病毒(fowl adenovirus, FAdV)的感染,本研究以血清1型FAdV保守的52K基因为模板设计引物和探针,通过矩阵法优化后建立了针对该病毒的TaqMan探针实时荧光定量PCR方法,并用该方法检测1日龄SPF鸡攻毒后咽、肛拭子排毒量及组织病毒载量。结果显示,该方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,只能检测出血清1型FAdV,对其他血清型FAdV和其他禽类病毒均无阳性扩增;最低检测限度低至10拷贝/μL;组间和组内离散度均小于2%;标准曲线为y=-3.836x+41.791,相关系数R2=0.996,具有良好的线性关系;对SPF鸡攻毒结果显示,在攻毒后第1~14日的咽、肛拭子均可检测到血清1型FAdV,在攻毒后第8日的肝脏、肾脏、肌胃、回肠中也可检测到病毒,而腺胃和盲肠中未检出病毒。本研究为血清1型FAdV的定量检测提供了方法。

主 题 词：血清1型FAdV TaqMan探针 荧光定量PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2024.05.01

馆 藏 号：203127957...