镰形扇头蜱丝氨酸蛋白酶SP30基因的克隆及原核表达

作     者：关洁 曹杰 张厚双 周勇志 周金林 

作者机构：上海师范大学生命与环境科学学院上海200234 中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点实验室上海200241 

基　　金：中央级公益性科研院所基本业务费(No.2012JB12)资助 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2012年第20卷第6期

页      码：45-50页

摘      要：根据丝氨酸蛋白酶保守性氨基酸序列设计引物,以镰形扇头蜱半饱血雌蜱cDNA为模板,经PCR扩增得到SP30基因的保守区,通过5 RACE(rapid amplification of cDNA Ends)和3 RACE技术得到全长基因。将该基因连入原核表达载体pGEX-4T-1,经IPTG诱导纯化得到重组蛋白。以镰形扇头蜱卵、幼蜱、若蜱、成蜱各发育阶段的cDNA为模板进行Real-timePCR实验。结果显示,SP30基因全长1194 bp,开放阅读框长900 bp,编码299个氨基酸,预计蛋白分子质量30 kDa。Real-time PCR分析结果表明,该基因在四个不同的发育阶段均有不同程度的表达。

主 题 词：镰形扇头蜱 丝氨酸蛋白酶SP30基因 原核表达 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6422.2012.06.009

馆 藏 号：203128100...