道地药材天麻DNA真伪鉴定试剂盒的研制与评价

作     者：马秋贺 马玉贺 刘悦 李涛 高丽君 夏薇 李明成 曲永梅 MA Qiuhe;MA Yuhe;LIU Yue;LI Tao;GAO Lijun;XIA Wei;LI Mingcheng;QU Yongmei

作者机构：北华大学医学技术学院吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林132013 吉林国安药业有限公司吉林132013 

基　　金：吉林省科技厅医药健康产业发展专项(20230401096YY) 北华大学研究生创新计划项目(研创合字058号) 吉林省科技厅重点科技成果转化项目(20170307001YY) 

出 版 物：《中国现代应用药学》 (Chinese Journal of Modern Applied Pharmacy)

年 卷 期：2024年第41卷第9期

页      码：1198-1203页

摘      要：目的建立一种将DNA提取技术与PCR技术相结合的天麻DNA真伪鉴定试剂盒,并对试剂盒性能进行方法学评价。方法通过美国国家生物技术信息中心(NCBI)查找天麻及其常见伪品紫茉莉根、大丽菊块茎、马铃薯的ITS2序列,应用DNAMAN进行多序列比对,NCBI-Primer-Blast设计天麻特异性引物。改良植物常用DNA提取的CTAB法,确保提取出高效的正品天麻及其常见伪品的基因组DNA,应用紫外分光光度法测其浓度及纯度。优化PCR反应体系,确定试剂盒的组成与反应条件,随机抽样检测市售天麻样品。结果应用所研制的试剂盒提取样品DNA,纯度OD260/OD280值为(1.87±0.13),灵敏度为10 ng·μL^(-1),3次重复性检测结果相同,反复冻融5、10、15、20次对检测效果无影响,于-20℃可保存1年,检测10个市售天麻样品,其中7个是正品,3个是伪品。结论道地药材天麻DNA真伪鉴定试剂盒特异性强,灵敏度高,重复性和稳定性均良好,检测结果准确,适用于天麻及其常见伪品的快速鉴别。

主 题 词：天麻 ITS2 DNA提取 真伪鉴定试剂盒 聚合酶链式反应 

学科分类：1007[医学-药学类] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13748/j.cnki.issn1007-7693.20231388

馆 藏 号：203128116...