TaqMan多重实时定量PCR快速检测3种常见食源性病原菌

作     者：艾鹏飞 王珊 高辉明 王雁伟 庞艳荣 张萌 Ai Pengfei;Wang Shan;Gao Huiming;Wang Yanwei;Pang Yanrong;Zhang Meng

作者机构：河北科技大学食品与生物学院石家庄050018 

基　　金：河北省重点研发计划项目(19227137D) 河北省大中学生科技创新能力培育专项(22E50074D) 

出 版 物：《中国食品学报》 (Journal of Chinese Institute Of Food Science and Technology)

年 卷 期：2024年第24卷第5期

页      码：373-380页

摘      要：建立一种可同时快速检测大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌和蜡样芽孢杆菌的多重实时定量PCR(qPCR)方法。依据大肠杆菌O157:H7 tir基因、单增李斯特菌mpl基因和蜡样芽孢杆菌entFM基因的保守序列分别设计特异性引物和TaqMan探针,建立多重qPCR反应体系,进行灵敏度、特异性和稳定性试验,同步检测人工染菌牛奶样品中的病原菌并与国家标准方法作对比。结果表明,建立的多重qPCR方法灵敏度高,最低检出限为12 CFU/mL;特异性强,只对3种目标菌进行PCR扩增;稳定性好,各重复性试验中Ct值的变异系数<1%;所有受污染样品阳性检出率均为100%,与国家标准方法检测结果一致,且检测周期缩短至6 h。本研究建立的TaqMan多重qPCR方法能同时快速、准确地检测乳品中的大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌和蜡样芽孢杆菌,为食品安全提供技术支撑。

主 题 词：TaqMan探针 多重实时定量PCR 大肠杆菌O157:H7 单增李斯特菌 蜡样芽孢杆菌 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 100403[100403] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.16429/j.1009-7848.2024.05.031

馆 藏 号：203128201...