基于ttrA基因优化环介导等温扩增技术检测食品中沙门氏菌

作     者：任翔 邹颜秋硕 汤晓召 杨菁 杨祖顺 REN Xiang;ZOU Yanqiushuo;TANG Xiaozhao;YANG Jing;YANG Zushun

作者机构：云南省疾病预防控制中心云南昆明650022 

基　　金：云南省重大科技专项(202002AE32005) 

出 版 物：《食品科技》 (Food Science and Technology)

年 卷 期：2024年第49卷第4期

页      码：353-360页

摘      要：目的:优化食品沙门氏菌环介导等温扩增检测技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),更快更准确地检测食品中沙门氏菌,为食品中沙门氏菌的防控提供技术支撑。方法:根据沙门氏菌ttrRSBCA转座子中ttrA四亚硫酸还原酶亚基A基因,重新设计新的环介导等温扩增检测引物,通过与发表的invA1引物、invA2引物、invA3引物、bcfD引物及市售两款D牌及S牌检测试剂盒进行范围性实验、特异性实验、灵敏度实验,对该引物的LAMP检测方法进行验证。结果:重新设计的ttrA、ttrB-2、ttrA120-1引物在检测沙门氏菌方面具有较强的稳定性。在对14种非沙门氏菌检测中,引物ttrA120-1、引物bcfD和市售S牌检测试剂盒排他性达到100%。引物ttrA及市售D牌检测试剂盒排他性分别为64.3%和85.7%。invA1、invA3引物排他性为0%,特异性极差。在对26种不同血清型沙门氏菌检测时,引物ttrA120-1能有效检测23种沙门氏菌,检测包容性为88.5%。引物ttrA能有效检测22种沙门氏菌,包容性为84.6%。引物bcfD能够检测出19种沙门氏菌,包容性为73.1%。市售的D牌及S牌检测试剂盒分别能检测19种及20种沙门氏菌,包容性分别为73.1%和76.9%。灵敏度实验中,DNA浓度在3.2×10^(–5) ng/μL时,使用ttrA120-1引物可以正常检测。结论:引物ttrA120-1在灵敏性、特异性、检测能力上都优于文章所对比的市售试剂盒及所发表的引物序列,能够更准确、更高效地在食品沙门氏菌快速检测中进行运用。

主 题 词：食源性疾病 沙门氏菌 ttrA基因 环介导等温扩增 引物 

学科分类：09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

D　O　I：10.13684/j.cnki.spkj.2024.04.042

馆 藏 号：203128226...