基于慢病毒系统构建AMPKα1过表达的3T3-L1细胞系

作     者：段文婷 李倩 DUAN Wenting;LI Qian

作者机构：内蒙古医科大学附属医院药学部内蒙古呼和浩特010010 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2024年第34卷第3期

页      码：269-274页

摘      要：[目的]采用慢病毒系统构建AMP依赖的蛋白激酶α1(AMP activated protein kinase α1,AMPKα1)基因过表达的3T3-L1细胞系,探讨其对炎症因子表达水平的影响。[方法]在美国国家生物技术信息中心(NCBI)上查找到AMPKα1的基因序列,利用SnapGene软件设计引物,进行目的基因扩增、纯化。将纯化后的AMPKα1片段克隆到PLJM1-EGFP载体质粒上,构建好的质粒与辅助质粒共同转染到HEK293T细胞中,收集病毒液。用含有病毒液的培养基培养3T3-L1细胞,待抗性蛋白表达后用嘌呤霉素筛选,杀死未成功转染的3T3-L1细胞,更换新鲜的完全培养基继续培养。[结果]成功构建稳定过表达AMPKα1的3T3-L1细胞系(P<0.05);AMPKα1过表达的3T3-L1细胞系的炎症因子MCP-1蛋白表达水平降低(P<0.05),炎症减轻。[结论]过表达3T3-L1细胞中的AMPKα1,减轻炎症因子MCP-1的表达水平(P<0.05)。

主 题 词：慢病毒系统 基因过表达 AMP依赖的蛋白激酶α1 3T3-L1细胞 稳转 单核细胞趋化蛋白-1 肥胖 质粒 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100104[100104] 10[医学] 

D　O　I：10.16519/j.cnki.1004-311x.2024.03.0040

馆 藏 号：203128357...