基于RPA等温扩增的松材线虫快速检测技术体系建立

作     者：张伟 车吉明 理永霞 马健 李东振 张星耀 ZHANG Wei;CHE Jiming;LI Yongxia;MA Jian;LI Dongzhen;ZHANG Xingyao

作者机构：中国林业科学研究院森林生态环境与自然保护研究所国家林业和草原局森林保护学重点实验室北京100091 南京林业大学南方现代林业协同创新中心江苏南京210037 山东省烟台市昆嵛山林场山东烟台264100 胶州市自然资源和规划局山东胶州266300 

基　　金：“十四五”国家重点研发计划项目“松材线虫病灾变机制与可持续防控技术研究”(2021YFD1400900) 国家自然科学基金项目“松墨天牛协助松材线虫扩散型四龄幼虫发育成熟的作用机理”(32271896) 

出 版 物：《中国森林病虫》 (Forest Pest and Disease)

年 卷 期：2024年第43卷第3期

页      码：1-8页

摘      要：利用松材线虫Bursaphelenchus xylophilus基因组分析和等温扩增技术,设计生产松材线虫野外快速检测技术产品并测试其效果。结果表明:比较分析松材线虫和拟松材线虫Bursaphelenchus mucronatus基因组发现松材线虫特异性基因Bx-gene12,以此为基础设计特异性扩增引物和探针,对采集自不同地区的松材线虫、拟松材线虫和松树内其他线虫株系采用研磨颗粒以1500 r/min转速震荡5 min的破碎方法有效释放线虫DNA,40℃等温扩增15 min反应条件下可有效区分松材线虫和其他线虫,检测灵敏度达到100 fg或1条线虫;该快速检测方法在25 min内有效检测出染病黑松Pinus thunbergii和赤松Pinus densiflora松木内的松材线虫。利用RPA等温扩增技术实现25 min内对野外环境下松材线虫的快速检测,可为松材线虫病及时有效防控提供支持。

主 题 词：松材线虫 快速检测 等温扩增 技术体系 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D　O　I：10.19688/j.cnki.issn1671-0886.20240022

馆 藏 号：203128419...