蛋白质二硫键异构酶PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖与成肌分化的影响

作     者：王梅 甄珍 胡德宝 张林林 李新 郭益文 郭宏 丁向彬 

作者机构：天津农学院动物科学与动物医学学院天津市农业动物繁育与健康养殖重点实验室天津300384 

基　　金：国家自然科学基金项目(31772559) 

出 版 物：《中国畜牧杂志》 (Chinese Journal of Animal Science)

年 卷 期：2024年第60卷第7期

页      码：158-164页

摘      要：牛骨骼肌卫星细胞是一种多功能干细胞,能修复受损的骨骼肌。蛋白质二硫键异构酶PDIA3在肌肉再生过程中起关键作用。本试验旨在研究PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的影响。利用牛骨骼肌卫星细胞体外成肌分化模型,设计合成PDIA3的干扰模型,并构建PDIA3的过表达载体pcDNA3.1-PDIA3,检测其干扰和过表达效果。采用EdU染色法检测PDIA3表达量的改变对细胞增殖的影响,通过肌管形成状态检测对分化进程的影响,并采用RT-qPCR和Western Blot方法检测牛骨骼肌卫星细胞在RNA水平和蛋白水平上增殖标志因子和分化标志因子的变化,综合分析干扰和过表达PDIA3对牛骨骼肌卫星细胞增殖和分化的影响。结果显示:与对照组相比,干扰或过表达PDIA3后Pax7在mRNA和蛋白表达水平均无明显变化,EdU阳性细胞率无明显变化,表明PDIA3表达水平的改变对其增殖无明显影响。干扰PDIA3后,可发现肌管数量明显少于对照组,肌管直径明显变小,分化标志因子MyHC的RNA表达水平极显著降低,MyHC的蛋白表达水平显著降低;而过表达PDIA3后,可发现肌管数量明显多于对照组,肌管直径明显变大,且分化标志因子MyHC的RNA表达水平和蛋白水平均显著升高。以上结果表明PDIA3能正向调节牛骨骼肌卫星细胞的分化过程。本研究结果为PDIA3在肌肉发育的研究提供了一定的参考。

主 题 词：PDIA3 牛骨骼肌卫星细胞 细胞增殖 细胞分化 

学科分类：0905[农学-林学类] 09[农学] 

D　O　I：10.19556/j.0258-7033.20230509-02

馆 藏 号：203128459...