塞内卡病毒LAMP可视化快速检测方法的建立及初步应用

作     者：田瑶 李琛 杨莹 李佳昕 王硕 时建立 彭喆 徐绍建 吴晓燕 刘畅 韩红 韩先杰 李俊 TIAN Yao;LI Chen;YANG Ying;LI Jiaxin;WANG Shuo;SHI Jianli;PENG Zhe;XU Shaojian;WU Xiaoyan;LIU Chang;HAN Hong;HAN Xianjie;LI Jun

作者机构：青岛农业大学动物医学院青岛266109 山东省农业科学院畜牧兽医研究所济南250100 山东师范大学生命科学院济南250100 

基　　金：山东省重大科技创新工程(2023CXGC010705) 山东省现代农业产业技术体系(SDAIT-08-06) 山东省科技型中小企业创新能力提升工程(2023TSGC0734) 国家自然基金(32302911) 山东省自然基金(ZR2022MC011) 济南市“新高校20条”(202228112) 山东省农业科学院科技创新工程(CXGC2018E10) 

出 版 物：《中国动物传染病学报》 (Chinese Journal of Animal Infectious Diseases)

年 卷 期：2024年第32卷第3期

页      码：88-94页

摘      要：为建立塞内卡病毒(SVA)的快速检测方法,本研究在SVA高度保守区域,分别设计了5对特异性LAMP引物,并通过反应条件优化、敏感性试验、特异性试验以及临床样本检测,建立了一种经济、特异、敏感的SVA检测方法。在62℃水浴55 min扩增出大于220 bp的特异性阶梯状条带,以质粒为模板进行敏感性试验结果表明该方法在5.1 copies/μL时仍可以检测出SVA,比普通PCR敏感1000倍。特异性试验结果显示该方法与猪肺炎支原体(MPH)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪圆环病毒3型(PCV3)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合增病毒(PRRSV)均无交叉反应,应用该方法检测72例临床疑似病料,阳性率为33%(24例)。与普通PCR相比较,该方法操作简便、快速、特异、经济,本研究提供了一种更适于临床检测的SVA检测方法。

主 题 词：塞内卡病毒 环介导等温扩增 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.19958/j.cnki.cn31-2031/s.20220311.009

馆 藏 号：203128468...