槟榔黄化植原体TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法的建立

作     者：林兆威 孟秀利 唐庆华 牛晓庆 宋薇薇 LIN Zhaowei;MENG Xiuli;TANG Qinghua;NIU Xiaoqing;SONG Weiwei

作者机构：中国热带农业科学院椰子研究所/海南省院士团队创新中心海南文昌571339 

基　　金：海南省自然科学基金项目(No.321QN345) 海南省院士创新平台科研专项(No.YSPTZX202138,No.YSPTZX202151) 

出 版 物：《热带作物学报》 (Chinese Journal of Tropical Crops)

年 卷 期：2024年第45卷第6期

页      码：1120-1126页

摘      要：槟榔是海南省重要的热带经济作物,由植原体侵染引起的槟榔黄化病(areca palm yellow leaf disease,YLD)是当前我国槟榔生产上的一种毁灭性病害。为了建立精准高效的槟榔黄化植原体检测方法,本研究基于槟榔黄化植原体16SrDNA基因,设计并合成特异性引物AMf/AMr和探针AM-Prode,使用该方法进行准确性、敏感性、特异性及重复性测试,并在其他植物的植原体病害进行检测。结果显示:本检测方法能够准确的检测出阳性样品,健康样品无扩增曲线;在敏感性测试中,该检测方法能检测到1.16×10^(1) copies/μL样本浓度水平,其标准曲线方程为y=-3.4185x+43.624,扩增效率为96.12%,相关系数R^(2)=0.9833;在特异性测试中,该检测方法对YLD的检测具有较好的特异性,槟榔、槟榔其他病害病原及其内生菌的基因组对本方法未造成干扰;在重复性测试中,该检测方法对槟榔黄化病的检测具有较好的重复性;并且该检测方法可对苦楝黄化病、细圆藤丛枝病及辣椒黄化病等8种植原体病害进行检测,对植原体的检测具有一定的通用性。本检测方法的建立,有利于为槟榔黄化病的精准诊断、病原监测及媒介昆虫的检测等研究提供可靠的技术手段。

主 题 词：槟榔 槟榔黄化病 植原体 TaqMan实时荧光定量PCR 病害检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2561.2024.06.004

馆 藏 号：203128765...