猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的表达与纯化

作     者：姚瑶 宋杰 赵宝华 赵洪明 YAO Yao;SONG Jie;ZHAO Baohua;ZHAO Hongming

作者机构：河北师范大学生命科学学院河北石家庄050024 石家庄市畜牧水产局河北石家庄050056 

基　　金：石家庄市科技攻关项目(20100210) 

出 版 物：《河北师范大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hebei Normal University：Natural Science)

年 卷 期：2012年第36卷第3期

页      码：301-306页

摘      要：根据GenBank报道的PRRSV VR2332基因序列设计引物,经RT-PCR扩增,得到大小约为390 bp的阳性产物;利用BamHⅠ,EcoRⅠ位点将N蛋白基因片段克隆到pET-28a载体,构建原核重组表达质粒pET-N,转化BL21(DE3)并进行SDS-PAGE,Western blot分析.结果表明:克隆的N蛋白基因与GenBank报道的VR2332基因同源性为93.83%;重组菌株经IPTG诱导后,N蛋白基因得到了高效表达;经筛选得到最佳诱导条件,即1 mmol/L IPTG诱导6 h,蛋白表达量可达菌体蛋白总量的52.635%,SDS-PAGE后切胶回收可得到纯化的N蛋白,为进一步制备免疫胶体金试纸条或ELISA试剂盒提供基础.

主 题 词：N蛋白 诱导条件 Western blot 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13763/j.cnki.jhebnu.nse.2012.03.009

馆 藏 号：203128791...