一步法TaqMan~探针实时荧光定量RT-PCR快速检测PRRSV的建立及初步应用

作     者：路斌 袁秀芳 徐丽华 李军星 郭勇 王一成 LU Bin;YUAN Xiu-fang;XU Li-hua;LI Jun-xing;GUO Yong;WANG Yi-cheng

作者机构：浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021 浙江省海盐县畜牧兽医局浙江嘉兴730070 

基　　金：浙江省重大科技专项农业项目(2008C12049) 

出 版 物：《浙江农业学报》 (Acta Agriculturae Zhejiangensis)

年 卷 期：2012年第24卷第3期

页      码：396-403页

摘      要：根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,设计了1对特异性引物和1条TaqMan探针,建立了一步法检测PRRSV的荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法具有较高的特异性,与PCV,JEV,SFV,PRV,PPV无交叉反应;可以检测到10个拷贝数的模板RNA或1个TCID50的PRRSV,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)<1%,具有较好的重复性。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对72份PRRS疑似病例肺组织进行平行检测,结果荧光定量RT-PCR检出40份阳性,高于常规RT-PCR方法(28份阳性)。建立的荧光定量RT-PCR方法特异性好、灵敏度高,而且快速简便,可用于PRRSV的实验室快速诊断和流行病学调查。

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 实时荧光定量RT-PCR 一步法 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-1524.2012.03.008

馆 藏 号：203128792...