SIK2 cDNA及其截短体原核表达重组体的构建及表达

作     者：王建校 李珊珊 刘旭 王攀 刘晓丹 王豫 赵珊珊 周平坤 顾永清 WANG Jian-xiao;LI Shan-shan;LIU Xu;WANG Pan;LIU Xiao-dan;WANG Yu;ZHAO Shan-shan;ZHOU Ping-kun;GU Yong-qing

作者机构：石河子大学医学院新疆石河子832003 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 中国人民解放军第6411工厂职工医院河北石家庄050202 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30960093 31160183 31270894)~~ 

出 版 物：《西安交通大学学报（医学版）》 (Journal of Xi’an Jiaotong University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2014年第35卷第3期

页      码：290-294页

摘      要：目的构建SIK2cDNA及其截短体的原核表达重组质粒，在大肠杆菌中诱导表达。方法分别设计SIK2及其截短体引物，采用PCR方法分别扩增SIK2、SIK2-△1（280-926）、SIK2-△2（400-926）、SIK2-△3（1-400）、SIK2-△4（700-926）五个cDNA片段，并将扩增的cDNA片段插入原核表达载体pGEX4T2，构建GST标签的重组质粒。将构建好的重组质粒转化到大肠杆菌BL21中，用IPTG诱导SIK2、SIK2A1、SIK2-A2、SIK2-A3和SIK2A4五个截短体的原核表达，用考马斯亮蓝染色和Westernblot进行鉴定。结果成功构建了SIK2全长及其截短体cDNA的重组质粒，用考马斯亮蓝染色及Westernblot鉴定显示，SIK2全长及其截短体重组质粒均在大肠杆菌中诱导表达。结论在大肠杆菌中成功地诱导表达了SIK2重组蛋白及其截短体，为进一步研究SIK2各结构域的功能提供了实验基础。

主 题 词：盐诱导激酶 SIK2 GST 融和蛋白 诱导表达 重组质粒 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 1002[医学-临床医学类] 07[理学] 08[工学] 1010[医学-医学技术类] 09[农学] 071007[071007] 0703[理学-化学类] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.7652/jdyxb201403002

馆 藏 号：203128872...