海蚕新型抗菌肽Perinerin在毕赤酵母中的表达及活性测定

作     者：周庆峰 罗学刚 叶亮 申静 丁艳 段玥 奚涛 ZHOU Qing-feng;LUO Xue-gang;YE Liang;SHEN Jing;DING Yan;DUAN Yue;XI Tao

作者机构：中国药科大学生命科学学院生物技术中心南京210009 

出 版 物：《中国生物工程杂志》 (China Biotechnology)

年 卷 期：2006年第26卷第12期

页      码：45-49页

摘      要：Perinerin是一种分离自亚洲海蚕Perinereisaibuhitensis的结构新颖的抗菌肽,其对革兰氏阳性和阴性细菌均表现出强大的抑制作用;尤其对临床常见的耐药性绿脓杆菌更有明显的抑菌作用。为了解决生物提取过程中抗菌肽产量低下的问题,采用巴斯德毕赤酵母表达系统,对海蚕抗菌肽perinerin进行分泌性重组表达,并进行活性检测。首先通过修改的SOE法(Genesplicingbyoverlapextension)设计三对互补引物来合成完整的perinerin基因,将该基因片段插入到含有AOX1启动子和α分泌信号肽序列载体pPICZαA中,构建了重组表达质粒pPICZαA-PEN,再将其转化至PichiapastorisGS115宿主菌,利用甲醇来诱导外源基因在阳性菌株中的表达,表达产物经Tricine-SDS-PAGE电泳进行验证,并经超滤和阳离子交换层析进一步纯化。生物学活性检测证实重组蛋白对金黄色葡萄球菌及绿脓杆菌均具有明显抑制作用。

主 题 词：抗菌肽 Perinerin 毕赤酵母 重组表达 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.13523/j.cb.20061209

馆 藏 号：203130097...