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熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型的研究

熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型的研究

作     者:周世航 刘铭 于卫建 宫本兰 

作者机构:大连市血液中心辽宁大连116001 大连医科大学细胞生物学教研室 

出 版 物:《中国输血杂志》 (Chinese Journal of Blood Transfusion)

年 卷 期:2011年第24卷第9期

页      码:760-763页

摘      要:目的探讨熔解曲线分析法用于HPA-15基因分型,了解大连地区汉族人群HPA-15基因多态性。方法设计合成HPA-15等位基因特异性引物和1条公共引物,其中在2条等位基因特异性引物的5 末端分别加入具有不同长度并富含GC碱基的序列。使用这3条引物,进行实时PCR反应。在PCR反应后,进行熔解曲线分析,依据PCR产物熔解温度的差异,进行基因分型。应用熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法对100名大连地区汉族人群的血液标本进行HPA-15基因分型。此外对熔解曲线分析法的重复性进行评价。结果 100个血液标本的熔解曲线分析法和常规PCR-SSP法的基因分型结果是完全一致的。10个血标本的2次熔解曲线分析结果是一致的。大连地区汉族人群HPA-15a、-15b基因频率分别为0.58和0.42。大连地区汉族人群与国内部分地区汉族人群相比,HPA-15等位基因频率的差异无统计学意义(P>0.05)。与新疆维吾尔族人群相比,HPA-15等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HPA的熔解曲线基因分型方法具有快速、简单、准确、通量高、重复性好等优点,要优于常规的PCR-SSP法。在国内HPA-15等位基因分布存在着种族差异。

主 题 词:熔解曲线分析 血小板抗原 基因分型 PCR-SSP 基因频率 

学科分类:1001[医学-基础医学] 100102[100102] 10[医学] 

D O I:10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2011.09.020

馆 藏 号:203130284...

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