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猪圆环病毒2型GD株ORF2基因重组腺病毒的构建及其表达

猪圆环病毒2型GD株ORF2基因重组腺病毒的构建及其表达

作     者:宋长绪 蒋智勇 王贵平 高向阳 赵亚华 SONG Chang-xu;JIANG Zhi-yong;WANG Gui-ping;GAO Xiang-yan;ZHAO ya-hua

作者机构:广东省农业科学院兽医研究所广东广州510640 华南农业大学生命科学院广东广州510642 

基  金:国家863计划资助项目(批准号:2003AA241110) 广东省农业攻关项目(批准号:2003B21404) 

出 版 物:《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期:2005年第27卷第5期

页      码:348-351页

摘      要:根据PCV2 ORF2基因的序列设计两条引物从PCV2的PK15细胞培养物中扩增出ORF2基因(702 bp)。将此基因片段克隆入pMD 18_T载体,经酶切、测序鉴定筛选出重组质粒pMD_ORF2。将PCV2 ORF2基因克隆入pAdeasy腺病毒载体系统的穿梭质粒pAdTrack_CMV中,获得重组穿梭质粒pAdTrack_CMV_ORF2,将重组质粒与腺病毒骨架载体共转化大肠杆菌BJ5183,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒质粒pAdCMV_ORF2,然后用PacⅠ线性化后转染293细胞,在293细胞内包装出重组腺病毒。通过荧光显微镜观察、PCR检测和Western blot检测证明PCV2 ORF2基因在293细胞内获得表达,ORF2多肽具有良好的免疫原性。

主 题 词:猪圆环病毒2型 ORF2基因 重组腺病毒 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 090601[090601] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-水产类] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.3969/j.issn.1008-0589.2005.05.008

馆 藏 号:203131161...

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