大豆rbcS基因启动子的克隆及在转基因烟草中的功能缺失分析

作     者：崔喜艳 陈众峰 范贝 韩琳 刘晓庆 董雅致 张治安 CUI Xi-yan;CHEN Zhong-feng;FAN Bei;HAN Lin;LIU Xiao-qing;DONG Ya-zhi;ZHANG Zhi-an

作者机构：吉林农业大学生命科学学院吉林长春130118 吉林农业大学农学院吉林长春130118 

基　　金：国家自然科学基金项目(31171459) 吉林省自然科学基金项目(201215178) 

出 版 物：《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 (Journal of Northwest A&F University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2015年第43卷第5期

页      码：114-121 128页

摘      要：【目的】进一步验证栽培大豆rbcS基因启动子功能,为植物基因工程相关研究提供启动子资源。【方法】从栽培大豆中克隆了rbcS基因5′端上游1 538bp的DNA序列,根据光诱导表达调控元件及顺式作用功能元件所在的位置,设计含1 089,712和190bp 3个5′端缺失体,并将rbcS基因启动子(1 538bp)及3个5′端系列缺失体序列分别与gus基因融合,构建植物表达载体并命名为pGmrbcS、pA、pB和pC,用农杆菌介导法转化烟草,通过gus基因活性变化检测不同缺失体的表达特性。【结果】克隆了1 538bp的大豆rbcS基因启动子序列及1 089,712和190bp的5′端缺失体启动子片段。GUS活性检测表明,在pGmrbcS转基因烟草的叶中GUS活性最高,且与pCAMBIA1301转基因烟草叶片中CaMV35S启动子驱使gus基因的表达量相当,而茎、根中GUS活性较低。GUS定量分析表明,T1代转基因烟草光下培养时,3种缺失体启动子叶片中的GUS表达活性均与CaMV35S启动子相当,其中pB活性最高,是CaMV35S启动子活性的1.4倍,pA、pC活性低于pB,分别为pB活性的84%和71%;含pA的转基因烟草于黑暗中萌发的幼苗叶片gus基因不表达,光下萌发幼苗叶片有gus基因表达,而含有pB、pC的转基因烟草,在黑暗和光下萌发的幼苗叶片中均有gus基因表达,且表达量以pB最高。【结论】含有长度为1 089bp(pA)光诱导元件的rbcS基因缺失体启动子具有光诱导和组织特异表达特性,长度为712bp(pB)的缺失体启动子的启动活性最高。

主 题 词：栽培大豆 rbcS基因启动子 转基因烟草 功能缺失 

学科分类：09[农学] 

核心收录：

D　O　I：10.13207/j.cnki.jnwafu.2015.05.005

馆 藏 号：203131284...