超灵敏高特异性巢式PCR检测方法的建立及其在大黄鱼(Larimichthys crocea)弧菌病早期预警中的应用

作     者：魏雪莲 包红玉 李继姬 施慧 陶震 段鑫冰 叶莹莹 郭宝英 WEI Xue-Lian;BAO Hong-Yu;LI Ji-Ji;SHI Hui;TAO Zhen;DUAN Xin-Bing;YE Ying-Ying;GUO Bao-Ying

作者机构：浙江海洋大学国家海洋设施养殖工程技术研究中心浙江舟山316022 浙江省舟山市定海区经济和信息化局浙江舟山316041 浙江省海洋水产研究所浙江省海水增养殖重点实验室浙江舟山316021 浙江海洋大学水产学院浙江舟山316022 浙江海洋大学海洋科学与技术学院浙江舟山316022 

基　　金：浙江省省属高校基本科研业务费项目,2021J005号 浙江省自然科学基金重点项目,Z23D060004号 

出 版 物：《海洋与湖沼》 (Oceanologia Et Limnologia Sinica)

年 卷 期：2024年第55卷第4期

页      码：1008-1018页

摘      要：由哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、副溶血弧菌(***)及溶藻弧菌(***)等病菌感染导致的弧菌病是大黄鱼养殖中最常见、最具危害性的疾病之一,然而目前针对发病后的遏制手段有限,因此亟待建立高灵敏度、高特异性的病原检测技术以实现病害早期预警。在普通两轮巢式PCR引物的基础上,对这3种弧菌分别设计一套三轮巢式PCR引物,通过扩增条件优化、特异性检验及灵敏度测定,确定了能精准检测3种弧菌的方法,达到了扩增产物单一、参考菌假阳性检出率为0、靶序列最低检出灵敏度分别为2.50 copies/μL(哈维氏弧菌)、3.12 copies/μL(副溶血弧菌)、2.53 copies/μL(溶藻弧菌)等效果。利用开发的检测方法,检测了2021~2023年度浙江、福建一带大黄鱼养殖样本,所有样本均检测出哈维氏弧菌和溶藻弧菌,副溶血弧菌未检出。结果显示浙江、福建一带大黄鱼弧菌病主要是由哈维氏弧菌和溶藻弧菌引起。开发的检测方法有望应用于大黄鱼等养殖物种弧菌病的早期预警和常规检测。

主 题 词：巢式PCR 大黄鱼 弧菌病 病原检测 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 090801[090801] 07[理学] 0908[0908] 08[工学] 0906[农学-水产类] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

D　O　I：10.11693/hyhz20240400079

馆 藏 号：203131497...