环介导等温扩增技术检测间日疟原虫方法的建立及应用分析

作     者：王真瑜 江莉 蔡黎 王文静 张耀光 洪国宝 张小萍 卢伟 WANG Zhen-yu;JIANG Li;CAI Li;WANG Wen-jing;ZHANG Yao-guang;HONG Guo-bao;ZHANG Xiao-ping;LU Wei

作者机构：上海市疾病预防控制中心上海200336 

基　　金：国家自然科学基金(30872211) 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2012年第12卷第2期

页      码：157-161页

摘      要：目的建立一种快速、简便的检测间日疟原虫的环介导等温扩增方法(LAMP)并与常规PCR方法作比较。方法根据间日疟原虫环子孢子蛋白(CSP)基因序列合成2对特异性LAMP引物,优化Mg2+浓度、dNTPs浓度、BstDNA聚合酶添加量、反应温度、时间以及设计引物缺省试验。评估优化后的LAMP反应的特异性和灵敏性。检测133份患者血样,以显微镜检方法为金标准,比较LAMP和多重PCR法检测间日疟原虫的敏感性和特异性。结果 LAMP法检测重组质粒DNA(Pv-rDNA)的灵敏度达到10-10,为传统PCR方法的100倍。镜检确诊的68例间日疟、43例恶性疟和22例非疟疾患者中,LAMP法和多重PCR检测间日疟原虫的敏感性为98.53%和97.06%,两法基本相当(χ2=0.34,P>0.05);特异性为86.15%和100%,LAMP法低于多重PCR法,差异有统计学意义(χ2=9.67,P<0.05)。LAMP法的阳性预测值和阴性预测值分别为88.16%和98.25%,多重PCR的阳性预测值和阴性预测值分别为100%和97.01%。结论 LAMP法检测间日疟原虫具有快速简便、敏感性高、设备要求低的特点,具有较好的应用前景。

主 题 词：环介导等温扩增技术 间日疟原虫 基因检测 

学科分类：1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

馆 藏 号：203131857...