直接从粪便中检测致犊牛腹泻产肠毒素大肠杆菌的双重PCR方法的建立与应用

作     者：马广强 张维军 栾婧婧 林树乾 杨少华 刘文强 高运东 仲跻峰 赵宏坤 MA Guang-qiang;ZHANG Wei-jun;LUAN Jing-jing;LIN Shu-kun;YANG Shao-hua;LIU Wen-qiang;GAO Yun-dong;ZHONG Ji-feng;ZHAO Hong-kun

作者机构：山东省农科院奶牛研究中心济南250100 山东农业大学泰安2710181 

基　　金：山东省"三0"工程项目资助 项目编号:2003-3009 国家"十五"科技攻关奶业专项(2002BA518A16) 

出 版 物：《中国人兽共患病学报》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2006年第22卷第2期

页      码：153-156页

摘      要：目的产肠毒素大肠杆菌(Enterototxigenic,Escherichia Coli,ETEC)是造成人和动物腹泻的主要病原之一,也是造成新生乳用犊牛腹泻的主要原因,一株ETEC可能产生一种或者多种肠毒素。根据产肠毒素大肠杆菌产生的两种主要毒素的基因序列,设计了两对引物,建立多重PCR方法。该方法仅用4.5小时即可检测出导致犊牛腹泻的产肠毒素大肠杆菌菌株,具有敏感度高、特异性强和检测速度快等特点。本试验的目的是用所建立的多重PCR方法来确定ETEC在导致犊牛腹泻中的作用。采用该方法对乳用犊牛的203个腹泻样品进行了检测,结果,用传统的分离培养方法得到的203株典型大肠杆菌中有135株为ETEC;其中LT阳性为105株,ST阳性为126株,LT+ST阳性的为96株,阳性率为66.5%。而采用直接从粪样中提取PCR模板的方法进行PCR,检测到146个犊牛粪样为ETEC阳性,其中LT阳性为112株,ST阳性为137株,LT+ST阳性为103株,阳性率为71.9%,明显高于传统的检测方法;并且所检测到的146个ETEC阳性的犊牛粪样完全包含用传统的分离培养方法得到的135个阳性粪样,且基因分型结果相同。

主 题 词：ETEC 毒素基因 多重聚合酶链式反应 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2006.02.014

馆 藏 号：203131889...