ERA实时荧光法快速检测乙肝病毒的建立与应用

作     者：翁兴墉 邹林涛 周璇 唐红花 何军 邓仲良 WENG Xingyong;ZOU Lintao;ZHOU Xuan;TANG HongHua;HE Jun;DENG Zhongliang

作者机构：南华大学、衡阳医学院、公共卫生学院衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属第一医院衡阳421001 南华大学衡阳医学院附属南华医院检验科衡阳421001 

基　　金：湖南省教育厅重点项目(21A0261) 湖南省自然科学基金项目(2022JJ30501) 

出 版 物：《生物学杂志》 (Journal of Biology)

年 卷 期：2024年第41卷第4期

页      码：112-117页

摘      要：基于酶促重组等温扩增(ERA)技术构建一种快速检测乙肝病毒的实时荧光检测方法。根据乙肝病毒聚合酶编码区(P区)保守序列设计引物和探针,对引物、温度、荧光探针浓度等反应条件进行优化,建立ERA实时荧光法最佳反应体系,再对其敏感性、特异性、抗干扰能力、临床样本检出效果进行验证。结果显示:ERA实时荧光法在42℃、20 min内可完成对乙肝病毒的检测,最低检出限为102 copies/μL;除乙肝病毒外,其他4种病毒(甲肝病毒、丙肝病毒、EB病毒、巨细胞病毒)均未产生荧光扩增曲线,具有良好的特异性和抗干扰能力;以实时荧光PCR法检测结果为标准,ERA实时荧光法检测58份乙肝病毒临床样本的灵敏度为97.37%、特异度为100%、阴性预测值为95.24%、阳性预测值为100%、Kappa值为0.96。成功建立了一种简单、快速、灵敏、特异、低成本的乙肝病毒早期检测方法,满足乙肝病毒快速检测的需要。

主 题 词：酶促重组等温扩增技术 快速检测 乙肝病毒 ERA实时荧光法 早期诊断 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1007[医学-药学类] 100705[100705] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 07[理学] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 100401[100401] 071005[071005] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2095-1736.2024.04.112

馆 藏 号：203131909...