SHERLOCK-HBA检测方法的建立及其在血液鉴别中的应用

作     者：姚乾威 何红霞 胡胜 赵一霞 罗雨 季安全 孙启凡 YAO Qian-Wei;HE Hong-Xia;HU Sheng;ZHAO Yi-Xia;LUO Yu;JI An-Quan;SUN Qi-Fan

作者机构：山西医科大学法医学院太原030001 公安部鉴定中心法医遗传学公安部重点实验室北京100038 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院微生物流行病研究所北京100071 

基　　金：国家重点研发计划(2022YFC3341002) 公安部科技强警基础工作计划(2022JC11)资助项目 

出 版 物：《生物化学与生物物理进展》 (Progress In Biochemistry and Biophysics)

年 卷 期：2024年第51卷第8期

页      码：1971-1982页

摘      要：目的基于规律成簇的间隔短回文重复(CRISPR)/CRISPR关联蛋白质系统(Cas)技术建立检测血液特异性血红蛋白α(HBA)mRNA的方法,以准确、快速地鉴定血液样本。方法本研究通过设计和筛选血液特异性HBA mRNA上的CRISPR RNA(crRNA)短片段,基于CRISPR/Cas技术原理建立了SHERLOCK-HBA检测方法,对5种体液(包括外周血、月经血、唾液、阴道分泌液、精液)共79份样本进行检测以评价所建方法鉴别血液的能力,并通过种属特异性实验、灵敏度实验、模拟混合斑检测、模拟降解样本检测、实际案件样本检测等进一步验证实验体系的法医学应用能力。结果该方法检测人源血液的相对荧光单位(RFU)值显著高于非血液(P<0.0001)以及非人源血液样本(P<0.0001),对血液RNA的检出灵敏度可达1×10^(-3) ng,且可成功检测出混合斑迹以及陈旧降解斑迹中的微量血液成分。结论本研究成功建立了一种基于CRISPR/Cas技术的SHERLOCK-HBA检测体系,能准确、灵敏地鉴定血液,操作简单、快速,为快速识别血液类样本提供了新的思路和参考。

主 题 词：法医遗传学 血液鉴定 血红蛋白α CRISPR/Cas SHERLOCK 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 0301[法学-法学类] 03[法学] 030106[030106] 

核心收录：

D　O　I：10.16476/j.pibb.2023.0494

馆 藏 号：203132444...