CTX-M型阴沟肠杆菌的基因克隆及原核表达产物特性研究

作     者：江洁华 徐韫健 廖伟娇 李乃健 JIANG Jie-hua;XU Yun-jian;LIAO Wei-jiao;LI Nai-jian

作者机构：广州医学院第一附属医院检验科广州510120 广州医学院06级检验本科广州510180 

基　　金：广东省自然科学基金(No.5002318) 广东省科技厅项目(No.63077) 广州市科技局(No.2007J1-C0141) 广州市医药卫生科技(No.2007-YB-156) 

出 版 物：《热带医学杂志》 (Journal of Tropical Medicine)

年 卷 期：2008年第8卷第10期

页      码：1004-1008,1027页

摘      要：目的对阴沟肠杆菌所产CTX-M型β-内酰胺酶进行基因克隆、原核表达重组质粒的构建及其特性研究。方法以产CTX-M型β-内酰胺酶的阴沟肠杆菌45号基因组DNA为模板,设计两对引物PCR扩增CTX-M,将其克隆入pGEM-T载体后测定该核苷酸序列,再将CTX-M基因克隆到pGEX-6P-3表达质粒并转入感受态BL21,选择阳性菌落进行药物敏感试验和酶动力学检测。结果PCR扩增出大小为876bp和1067bp的基因片段,与GenBank上CTX-M-9和CTX-M-3酶的基因序列同源性为100%。CTX-M-3型重组菌株药敏试验结果与原菌株相比,对青霉素类和头孢噻肟具有明显的水解作用,第三、四代头孢菌素对之较为稳定,动力学结果与酶稳定性结果基本一致。结论重组质粒pGEX-6P-3/CTX-M构建成功,CTX-M-3型重组菌株与原菌株比较,对β-内酰胺类抗生素的敏感性和稳定性增加,亲和力下降。

主 题 词：CTX-M型 克隆 重组质粒 酶动力学 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-3619.2008.10.003

馆 藏 号：203132696...