禽流感RT-PCR诊断法的建立

作     者：崔尚金 陈化兰 唐秀英 邓国华 田国斌 于康震 

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 

出 版 物：《中国畜禽传染病》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：1998年第20卷第2期

页      码：105-107页

摘      要：根据禽流感病毒（ＡＩＶ）Ａ／Ｃｈｉｃｋｅｎ／Ｂｒｅｓｌｉｎ／１９０２（Ｈ７Ｎ７）株的血凝素（ＨＡ）基因参考序列设计合成一对Ｈ７ＨＡ特异引物，并应用ＳＤＳ－蛋白酶Ｋ法提取病毒ＲＮＡ，建立了逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＡＩＶＲＮＡ的方法。应用此法对鸡胚培养的ＡＩＶ尿囊液、ＳＰＦ感染鸡粪便进行了检测，并与琼脂扩散试验和电镜技术作了对比。特异性试验以新城疫病毒（ＮＤＶ）、传染性法氏囊病病毒（ＩＢＤＶ）、传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）、减蛋综合征病毒（ＥＤＳ－７６Ｖ）等的感染鸡胚尿囊液作为对照。结果表明，ＡＩＶ尿囊液ＲＴ－ＰＣＲ全部阳性，ＳＰＦ感染鸡粪便８７份，ＲＴ－ＰＣＲ检出６９份阳性，样品处理浓缩后琼脂扩散检出１１份，电镜检测了２３份样品，仅检出２份阳性。非特异性对照样品经ＲＴ－ＰＣＲ检测全部阴性。将ＡＩＶ感染鸡胚尿囊液作１０倍系列连续稀释，可检出稀释度为１０－２的病毒尿囊液。ＲＴ－ＰＣＲ最早检出时间为感染后第３天，而琼扩和电镜均是７天。该法具有高度的特异性和灵敏性，且节约时间（只需８小时左右）。

主 题 词：禽 RT-PCR 诊断 流行性感冒 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

馆 藏 号：203132777...