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DNA环介导恒温扩增技术快速检测霍乱弧菌

DNA环介导恒温扩增技术快速检测霍乱弧菌

作     者:徐义刚 李苏龙 李丹丹 张洪祥 姜艳春 Yigang Xu;Sulong Li;Dandan Li;Hongxiang Zhang;Yanchun Jiang

作者机构:黑龙江出入境检验检疫局检验检疫技术中心哈尔滨150001 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心海口570125 

基  金:国家质检总局科技计划项目(No.2008IK162) 黑龙江省博士后基金(No.LBH-Z09)资助~~ 

出 版 物:《生物工程学报》 (Chinese Journal of Biotechnology)

年 卷 期:2010年第26卷第3期

页      码:398-403页

摘      要:霍乱弧菌是一种重要的食源性致病菌,主要引起急性肠道传染病,其快速检测具有重要意义。根据霍乱弧菌的mdh管家基因序列,设计2对特异性检测引物,利用DNA环介导恒温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),经反应体系优化,成功建立了霍乱弧菌的LAMP快速检测方法。该方法最佳反应温度为65℃,60min完成检测,对培养菌的检测限为25CFU/mL,污染食品中霍乱弧菌的检测限为32CFU/g。对33株同种或近源细菌进行LAMP检测,仅霍乱弧菌得到阳性扩增。LAMP方法实践应用结果表明,对1057份虾、蟹、牡蛎、肉类、人腹泻物等样本进行检测,共检出85份阳性,与国际标准(ISO TS21872-1-2007)检测结果的符合率为100%。结果表明,本研究建立的霍乱弧菌LAMP检测方法特异性强、灵敏度高、操作简便,有利于霍乱弧菌疫情的监测。

主 题 词:环介导恒温扩增 快速检测 霍乱弧菌 mdh管家基因 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 0831[工学-公安技术类] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 1010[医学-医学技术类] 0836[0836] 100215[100215] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13345/j.cjb.2010.03.019

馆 藏 号:203133368...

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