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LAMP实时浊度法快速检测肠出血性大肠杆菌O157的研究

LAMP实时浊度法快速检测肠出血性大肠杆菌O157的研究

作     者:李碧霞 游淑珠 邝筱珊 冯家望 王小玉 唐食明 成晓维 许喜林 

作者机构:华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 珠海出入境检验检疫局技术中心广东珠海519015 

基  金:国家质检总局科技计划项目(2010IK174) 

出 版 物:《现代食品科技》 (Modern Food Science and Technology)

年 卷 期:2014年第30卷第7期

页      码:268-272,305页

摘      要:采用环介导等温扩增(Loop Mediated Isothermal Amplification,LAMP)技术,利用实时浊度仪实时检测LAMP反应过程中所产生的焦磷酸镁白色沉淀,实现对扩增反应全过程的监控,建立食品中肠出血性大肠杆菌(Enterohemorrhagic Escherichia coli,EHEC)O157的LAMP实时浊度法快速检测方法。针对EHEC O157抗原基因rfbE的序列设计4条特异性LAMP引物。通过实时浊度仪在恒温63℃下1小时完成检测,对方法的特异性、灵敏度、稳定性进行了评价,并进行了食品样品添加试验以评价其应用于实际样品的效果。结果显示,经优化后,该方法的最低检出限为2.8×103 CFU/mL,与PCR法灵敏度比较高100倍。样品添加试验能检出的最低添加菌量为2.8×102 CFU/25 g(或mL)。LAMP实时浊度法具有快速、灵敏、特异性高、操作简便的优势,为食源致病菌快速筛查提供了一种良好的检测模式。

主 题 词:环介导等温扩增技术 实时浊度仪 大肠杆菌O157 检测 

学科分类:0832[0832] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 09[农学] 0903[农学-动物生产类] 

核心收录:

D O I:10.13982/j.mfst.1673-9078.2014.07.046

馆 藏 号:203133518...

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