花生过敏原Ara h2.02的克隆、表达及免疫学鉴定

作     者：易海涛 刘志刚 闫浩 刘芳 赵郭存 夏立新 YI Hai-tao;LIU Zhi-gang;YAN Hao;LIU Fang;ZHAO Guo-cun;XIA Li-xin

作者机构：深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所广东深圳518060 

基　　金：国家自然科学基金(30871752) 深圳出入境检验检疫局科技计划项目(SZ2008105) 深圳市深港创新圈和深圳大学创新团队基金资助项目 

出 版 物：《江西师范大学学报（自然科学版）》 (Journal of Jiangxi Normal University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2010年第34卷第5期

页      码：531-535页

摘      要：通过提取花生总RNA,设计特异性引物,RT-PCR克隆花生Ara h2.02基因,将反转录的基因连入pMD19-T Simple Vector,提质粒酶切鉴定并测序,将测序正确的片段连入原核表达载体pET-32a(+)上,并转入BL21(DE3)宿主表达菌中,IPTG诱导表达、Western-blotting检测该重组蛋白的免疫原性.测序结果表明:克隆的花生Ara h2.02基因片段全长为519 bp,编码为172个氨基酸,与GenBank中蛋白序列100%相同.诱导表达后的蛋白经SDS-PAGE鉴定,目的蛋白大小与理论值相符.Western-blotting结果表明该蛋白能与花生过敏病人混合血清中的IgE结合,具有免疫原性.成功克隆并表达了花生过敏原Ara h2.02,该基因表达的重组蛋白具有良好的免疫原性.

主 题 词：花生 过敏原 Arah2.02 克隆 表达 免疫印迹 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-5862.2010.05.019

馆 藏 号：203133626...