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靶向STAT3的慢病毒表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖凋亡的影响

靶向STAT3的慢病毒表达载体的构建及其对血管平滑肌细胞增殖凋亡的影响

作     者:邱志兵 陈鑫 段超 许欢 QIU Zhi-bing;CHEN Xin;DUAN Chao;XU Huan

作者机构:南京医科大学附属南京第一医院南京市心血管病医院心胸外科210006 

基  金:基金项目:江苏省社会发展基金资助项目(BS2006013) 南京市医学科技发展计划资助项目(YKK08090) 

出 版 物:《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期:2011年第28卷第4期

页      码:506-509页

摘      要:目的构建大鼠STAT3基因的shRNA慢病毒表达载体,并观察其对大鼠血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响。方法针对STATS基因的不同部位设计4对shRNA的寡核苷酸片段,克隆到慢病毒载体PLKO-1中,构建靶向STA33基因的慢病毒载体PLKO.1-STA33-shRNA,检测并筛选最佳抑制效率的shRNA干扰载体。并将其转染大鼠血管平滑肌细胞,用噻唑蓝法和流式细胞仪检测沉默STAT3基因后对血管平滑肌细胞增殖和凋亡能力的影响。结果靶向STA33慢病毒表达载体构建成功。转染PLKO.1一STA33一shRNA后,STA33蛋白表达明显下降,其中以PLKO.1一STA33一S1最为明显,达到90%以上;转染PLKO.1-STA33-S1的细胞增殖能力(A值=0.25±0.05)明显低于未转染组(A值=0.62±0.12)和阴性对照组细胞(A值=0.59±0.11)(P〈0.05);而早期细胞凋亡率(26.9±2.8)%和晚期细胞凋亡率(9.5±1.6)%均明显高于未转染组和阴性对照组(P〈0.01)。结论成功构建并筛选最佳抑制效率的靶向STAT3慢病毒表达载体PLKO.1-STAT3-S1,该载体能有效抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖,并促进细胞凋亡。

主 题 词:STAT3 血管平滑肌细胞 血管再狭窄 RNA干扰 慢病毒 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2011.04.009

馆 藏 号:203133766...

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