金葡菌多重耐药基因norA的原核表达及其抗体制备

作     者：周学章 于录 李乾学 邓旭明 张艳萍 

作者机构：解放军军需大学军事兽医系 军事医学科学院军事兽医研究所长春130062 

出 版 物：《中国抗生素杂志》 (Chinese Journal of Antibiotics)

年 卷 期：2005年第30卷第10期

页      码：604-607页

摘      要：按金葡菌多重耐药转运蛋白N orA的编码序列设计引物,以金葡菌基因组DNA为模板,扩增出基因norA中约1155bp的cDNA片段,将所得片段与pM D 18-T载体连接,转化到感受态大肠埃希菌JM 109中,成功地筛选到阳性克隆,其质粒测序结果与文献报道一致。从阳性克隆中提取质粒,经N d eⅠ和X hoⅠ酶切,回收1155bp的目的片段,定向克隆到pET-28a(+)表达载体中,转化至感受态大肠埃希菌DH 5α中,提取质粒,再次转化到BL 21(DE 3)中,成功筛选到阳性克隆。经IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出norA部分基因的表达。利用得到的纯化蛋白免疫家兔,并通过间接EL ISA法检测抗体效价,证明得到相应抗体。

主 题 词：金葡菌 norA基因 原核表达 抗体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1002[医学-临床医学类] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13461/j.cnki.cja.003368

馆 藏 号：203134245...