甘氨酸和TritonX-100对ZZ-EGFP融合蛋白分泌表达影响的初步研究

作     者：唐金宝 杨洪鸣 张义军 李万忠 TANG Jin-bao;YANG Hong-ming;ZHANG Yi-jun;LI Wan-zhong

作者机构：潍坊医学院药学教研室261042 潍坊医学院药理学教研室261042 

出 版 物：《中国医药生物技术》 (Chinese Medicinal Biotechnology)

年 卷 期：2007年第2卷第4期

页      码：266-269页

摘      要：目的考察不同浓度的甘氨酸和TritonX-100对葡萄球菌蛋白质AZZ亲和肽-增强型绿色荧光蛋白(ZZ-EGFP)融合蛋白在大肠杆菌分泌表达的影响。方法研究设计为两因素三水平析因设计。向液体培养基中分别加入终浓度0、1%、2%的甘氨酸和0、1%、2%的TritonX-100(共9种组合方式,终浓度均为0者为对照组),诱导大肠杆菌周质腔内ZZ-EGFP融合蛋白泄漏到液体培养基中,以培养上清液荧光强度为观察指标,通过ZZ-EGFP融合蛋白浓度-荧光强度标准曲线快速检测培养基中ZZ-EGFP融合蛋白表达量。结果培养基中分别加入1%、2%甘氨酸或1%、2%TritonX-100培养后,培养上清液荧光强度分别为283±11、711±19和622±25、733±25,与对照组(74±5)比较,组间差异均有统计学意义(甘氨酸:F=10.881,P=0.024;TritonX-10:F=12.848,P=0.018);而且甘氨酸与TritonX-100两者之间有交互效应(F=5.441,P=0.005),其中培养基中同时含有终浓度2%甘氨酸及1%TritonX-100时培养上清液荧光强度最高(1854±45),ZZ-EGFP融合蛋白分泌表达量达到10.4mg/L,与对照组(0.94mg/L)相比提高了11倍。结论甘氨酸和TritonX-100能提高ZZ-EGFP融合蛋白在液体培养基中的分泌表达量。

主 题 词：甘氨酸 辛苯昔醇 重组融合蛋白质类 葡萄球菌蛋白质A 绿色荧光蛋白质类 大肠杆菌 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-713X.2007.04.006

馆 藏 号：203134583...