弓形虫表面抗原P22编码基因片段的克隆及序列测定

作     者：高世同 吴少廷 林敏 梁驹卿 占国清 

作者机构：深圳市卫生防疫站深圳518020 广东省妇幼保健医院 

出 版 物：《中国人兽共患病杂志》 (Chinese Journal of Zoonoses)

年 卷 期：2000年第16卷第2期

页      码：62-64页

摘      要：目的克隆弓形虫表面抗原P22编码基因片段并进行序列测定。方法设计合成1对引物，采用PCR法扩增出P22目的基因片段，以低熔点琼脂糖回收纯化，并以限制性内切酶BamHI和KpnI双酶切后，插入质粒载体p5．6的多克隆位点，构建重组体p5．6／P22，并转化大肠杆菌DH5α，快速酸法初筛阳性重组子，并以PCR法与限制性酶切分析对阳性克隆进一步鉴定。被鉴定的重组子以双脱氧链终止法进行序列测定。结果从弓形虫核酸提取物中扩增出约593bpDNA条带，与预期扩增片段大小相符，空白对照无特异性扩增条带；所构建p5．6／P22重组体阳性克隆经双酶切与PCR鉴定与预期结果一致；序列测定的结果确证了插入片段的正确性。结论体外成功扩增、克隆了弓形虫表面抗原P22编码基因片段，并经序列分析所验证，为弓形虫P22表面抗原的表达以及弓形虫疫苗的制备作好铺垫。

主 题 词：P22表面抗原 克隆 序列分析 弓形体病 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100201[100201] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-2694.2000.02.019

馆 藏 号：203134613...